▶ 服务介绍
双荧光素酶检测利用两种不同的荧光素酶(如萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶)的相对表达量来检测特定基因的活性。通过比较实验组和对照组中两种荧光素酶的发光强度,可以准确评估靶基因的表达水平或启动子的活性。
①双荧光素酶-靶基因检测:在双荧光素酶系统中,通常将目标基因的调控序列(如启动子)与萤火虫荧光素酶基因连接在一起。当目标基因被激活时,萤火虫荧光素酶会发出荧光,从而实现靶基因的检测。
②双荧光素酶-启动子检测:通过将感兴趣的启动子序列克隆到荧光素酶报告基因的上游,检测启动子的活性。不同条件下启动子活性的变化可以通过荧光强度的变化来反映,从而研究基因表达的调控机制。
双荧光素酶报告基因检测是一种用于验证microRNA(miRNA)与mRNA、miRNA与长链非编码RNA(LncRNA)之间的靶向互作关系的技术。Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。是检测转录因子与目的基因启动子区DNA、miRNA与mRNA相互作用的一种检测方法。
▶ 实验优势:
①免费、专业的结合分析;
②丰富的载体选择,免费提供293T作为工具细胞;
③快速的克隆构建;
④完善的配套细胞学验证。
▶ 实验流程
发货标准:双荧光素酶检测原始数据、完整的实验报告和数据分析。
客户提供:miRNA-靶基因验证:靶基因、miRNA名称及种属;
启动子研究:启动子、转录因子名称及种属。
▶ 产品目录表
▶ 结果示例
工具质粒psiCHECK2用于miRNA与其靶点相关分析,包括miRNA靶基因验证、circRNA和lncRNA 。
1.验证miRNA同mRNA靶向互作。
将靶mRNA的3'UTR序列插入报告基因载体,与miRNA共转入细胞中,如果荧光素酶活性下降,则提示为其靶序列。
2.验证miRNA同circRNA靶向互作。
将circRNA序列插入报告基因载体中F-Luc的3'UTR区域,与miRNA共转入细胞中,检测荧光素酶活性。
3.验证miRNA同lncRNA靶向互作。
将lncRNA序列插入报告基因载体中F-Luc的3'UTR区域,与miRNA共转入细胞中,检测荧光素酶活性。
▶ 实验交付示例
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