原位杂交（fish）是指将特定标记的已知序列核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。
原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行，也可以检测两个靶基因的共定位情况。
病理检测
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原位杂交（FISH）
▶ 产品介绍
▶ 载基优势
1.采用进口abcam、CST、Santa、omnimabs抗体；
2.可免费使用我司细胞库、组织库已有细胞或石蜡切片，无需购买；
3.提供完整的实验数据及实验报告(包括实验仪器、试剂、方法步骤、结果、数据分析、结论等)。
▶ 实验流程
▶ 实验步骤
1.石蜡切片常规脱蜡至水，用免疫组化笔画圈。
2.消化：根据组织固定时间长短，切片置于修复液中煮沸10-15min，自然冷却。后组化笔画圈，根据不同组织不同指标特性，滴加蛋白酶K(20ug/ml)37℃消化20-30min。纯水冲洗后PBS洗3次×5min。根据切片情况选择最佳消化时间。
3.预杂交：滴加预杂交液，37°C孵育1h。
4.杂交：倾去预杂交液，滴加含探针杂交液,恒温箱37℃杂交过夜。
5.杂交后洗涤：洗去杂交液，2×SSC，37°C洗10min，1×SSC，37°C洗2×5min，0.5×SSC室温洗10min。若非特异杂交体教多，可以增加甲酰胺洗涤。
6.DAPI复染核：切片滴加DAPI染液，避光孵育8min，冲洗后滴加抗荧光淬灭封片剂封片后于荧光显微镜下观察。
▶ 结果示例
小鼠肿瘤组织石蜡切片：
小鼠肿瘤组织石蜡切片：
2.可免费使用我司细胞库、组织库已有细胞或石蜡切片，无需购买；
3.提供完整的实验数据及实验报告(包括实验仪器、试剂、方法步骤、结果、数据分析、结论等)。
DAB实验：制备石蜡切片-阻断-杂交-封闭-滴加anti-DIG-HRP试剂-DAB显色-复染细胞核-封片镜检
客户提供：提供固定后的样本/包埋后的蜡块/切片和原位杂交试剂盒，固定液样本、蜡块常温运输；石蜡切片冰袋运输；细胞爬片加原位杂交固定液固定15min后，换无酶PBS，密封，冰袋运输；原位杂交试剂盒冰袋运输。
▶ 实验步骤
1.石蜡切片常规脱蜡至水，用免疫组化笔画圈。
2.消化：根据组织固定时间长短，切片置于修复液中煮沸10-15min，自然冷却。后组化笔画圈，根据不同组织不同指标特性，滴加蛋白酶K(20ug/ml)37℃消化20-30min。纯水冲洗后PBS洗3次×5min。根据切片情况选择最佳消化时间。
3.预杂交：滴加预杂交液，37°C孵育1h。
4.杂交：倾去预杂交液，滴加含探针杂交液,恒温箱37℃杂交过夜。
5.杂交后洗涤：洗去杂交液，2×SSC，37°C洗10min，1×SSC，37°C洗2×5min，0.5×SSC室温洗10min。若非特异杂交体教多，可以增加甲酰胺洗涤。
6.DAPI复染核：切片滴加DAPI染液，避光孵育8min，冲洗后滴加抗荧光淬灭封片剂封片后于荧光显微镜下观察。
▶ 结果示例
L929细胞:
小鼠肿瘤组织石蜡切片：
小鼠肿瘤组织石蜡切片：
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