疾病模型＆免疫缺陷鼠
ApoE小鼠
ApoE 基因敲除小鼠是通过同源重组技术制备的具有 3 号外显子纯合缺失的小鼠模型。2017 年斯贝福（北 京）生物技术有限公司从国家啮齿类实验动物种子中心引入培育。
特征
1.ApoE 小鼠模型表现出异常高血脂症状，在 3 月龄时即出现动脉脂肪堆积，17 月龄时小鼠脑内将出现脂瘤性纤维瘤。
2.学习记忆能力出现障碍，其与 CHD、高脂血症、脑梗塞、AD 及慢性乙型肝炎等疾病相关。
用途
用于研究 ApoE 基因相关疾病，如糖尿病与肥胖研究，心血管研究，动脉粥样硬化研究以及新陈代谢研究。
成长曲线
生理生化数据
样本信息和目的
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样本：ApoE小鼠
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目的：确认ApoE小鼠基因修饰类型
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靶基因：ApoE apolipoprotein E（apoE）
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NCBI号：11816
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NCBI链接：https//www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/11816
方法和结果
ApoE（apolipoprotein E）是载脂蛋白 E，一种脂肪结合蛋白（载脂蛋白），乳糜微粒和中密度脂蛋白（IDLs）的一部分。ApoE 主要负责运输脂蛋白、脂溶性维生素及胆固醇。ApoE 基因位于 Chr7 上，共有 7 个外显子。
查询目前所有 ApoE 敲除品系的设计方案和基因型鉴定方案，结果显示目前的方案主要有两种：胚胎干细胞技术和 CRISPR/Cas9 方案，针对两种方案分别设计扩增和测序引物，具体方案如表1：
ApoE 纯合子靶基因 PCR 扩增及琼脂糖凝胶电泳结果如图 2，结果显示，该动物为 ES 干细胞法制作的 ApoE 突变小鼠。
注：1、2为方案1扩增结果，3、4为方案2扩增结果，5、6为方案3扩增结果。1、3、5泳道基因组模板为ApoE小鼠，2、4、6泳道为空白对照组，模板为水。
ApoE 突变小鼠是 Nobuyo Maeda 博士在 The University of North Carolina 开发的，他们使用胚胎干细胞技术产生 ApoE 基因突变的小鼠品系，质粒载体设计方案如图 3：
使用oIMR0180和oIMR0182 引物对靶基因进行扩增，并进行双向 Sanger 测序。与 NCBI 报道的 ApoE 基因外显子序（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/NM_009696.4）比对，结果显示：oIMR0180 引物正向测序比对失败（结果未显示），oIMR0182 反向测序，ApoE 基因 3 号外显子部分序列可以拟合。ApoE 基因外显子序列上 289 号碱基开始3号外显子剩余序列被Neo基因（新霉素抗性基因 ）所取代（如图 4）。ApoE 基因其他外显子扩增测序结果未显示突变。
结论
斯贝福（北京）生物技术有限公司 ApoE 小鼠的基因编辑类型为：ApoE 基因3号外显子部分碱基（125bp）和部分内含子被 Neo 基因取代，其他外显子无突变。
